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建立液相色谱串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素、氟甲砜霉素、甲砜霉素和甲硝唑的分析方法.试样经乙酸乙酯提取,MCX固相萃取柱净化,选择Kinetex C18型(100 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱,以乙腈与5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸)流动相进行梯度洗脱,流量为0.4 mL/min,进样体积为10μL.采用多反应监测(MRM)模式检测,以氯霉素-D5和甲硝唑-D4为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定.4种抗生素的质量浓度在0.25~10μg/L范围内与各自的色谱峰面积线性关系良好,线性相关系数均大于0.995,检出限为0.08μg/L.测定结果的相对标准偏差为3.7%~8.9%(n=6),平均加标回收率为90.2%~105.7%.该方法适用于蜂蜜中氯霉素、氟甲砜霉素、甲砜霉素、甲硝唑的检测.