人Toll样受体2胞外区基因重组腺病毒的制备及鉴定

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：meng20040511

【摘要】

：

目的构建含有人Toll样受体2（TLR2）胞外区基因的重组腺病毒载体并进行鉴定。方法应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞（PBMC）中扩增TLR2胞外区全长基因,克隆入pMD18-T载体并经测序

【作者】

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孙守勋李强刘静蒲晓允

【机构】

：

第i军医大学新桥医院检验科

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

TOLL样受体2 腺病毒科同源重组 Toll like receptor 2 adenoviridae homologous recombination

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目的构建含有人Toll样受体2（TLR2）胞外区基因的重组腺病毒载体并进行鉴定。方法应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞（PBMC）中扩增TLR2胞外区全长基因,克隆入pMD18-T载体并经测序验证后,通过KpnⅠ和HindⅢ双酶切将目的片段定向克隆至经相同处理的pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒中。将构建正确的重组质粒pAdTrack-CMV-TLR2用PmeⅠ酶切线性化后转化感受态AdEasier-1细菌,在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行细菌内同源重组,获得重组腺

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