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目的
探讨皮层神经细胞在创伤性脑损伤合并放射复合伤(TRI)后自噬相关蛋白表达及意义。
方法58只SD雄性成年大鼠按随机数字表法分为假手术组(15只)、单纯创伤性脑损伤(TBI)组(15只)、单纯放射性脑损伤(RBI)组(14只)和TRI组(14只)。TBI组为通过液压致侧方液压皮层损伤;RBI组接受60Co全身单次4.5 Gy照射;TRI组皮层液压损伤模型制备成功后30 min内接受60Co全身单次4.5 Gy照射。各组模型制备成功后6周采用HE染色检测皮层神经细胞损伤情况;Western blot印迹法检测微管相关蛋白1轻链3–Ⅱ(LC3–Ⅱ)及自噬相关蛋白Beclin–1的表达。
结果TBI组损伤区皮层神经细胞数目为(68.7±7.8)个,较假手术组(96.9±9.6)个减少(P<0.05)。TBI组出现较明显核固缩和溶解,无明显空泡,LC3–Ⅱ表达增加(P<0.05)。RBI组神经细胞数目为(59.3±7.4)个,较假手术组减少(P<0.05),与TBI组差异无统计学意义(P>0.05)。RBI组神经细胞无空泡变性,核固缩、溶解不明显。与假手术组、TBI组比较,RBI组Beclin–1和LC3–Ⅱ明显增加(P<0.01)。TRI组神经细胞数目为(45.8±7.8)个较TBI、RBI组明显减少(P<0.05),且空泡变性增多,胞核固缩、溶解明显,LC3–Ⅱ与Beclin–1表达量明显下降(P<0.01)。
结论TBI及RBI后,损伤区皮层自噬水平提高,而当TBI合并RBI后,损伤"叠加",皮层神经细胞自噬水平明显下降,伴随细胞变性死亡增加,提示自噬在脑损伤中起保护作用。