【摘 要】
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以分泌抗CD5单克隆抗体的杂交瘤细胞poly(A)mRNA为模板,通过RT-PCR扩增出抗CD5单克隆抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)cDNA片段组装出抗CD5单链抗体(ScFv)cDNA片段.该Sc
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以分泌抗CD5单克隆抗体的杂交瘤细胞poly(A)mRNA为模板,通过RT-PCR扩增出抗CD5单克隆抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)cDNA片段组装出抗CD5单链抗体(ScFv)cDNA片段.该ScFv片段被克隆到pCANTAB 5E载体上,以E.coli TG1为宿主,进行噬菌体表面呈现.通过Molt-4细胞表面分子CD抗原,对噬菌体表面呈现的ScFv进行免疫亲和富集筛选.经细胞-ELISA鉴定,得到4株高亲和力克隆.DNA序列分析得知,单链抗体全长732碱基,其中VH为339碱基,VL为
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