【摘 要】
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目的：构建人抑癌基因NKX2-3的真核表达载体,并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法：采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人NKX2-3基因,将其克隆到Flag-pc DNA3.0载体中,酶切和测序验证
【机 构】
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第二炮兵总医院结直肠肛门外科,军事医学科学院生物工程研究所,解放军总医院第一附属医院肿瘤一科,解放军180医院内3科
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目的：构建人抑癌基因NKX2-3的真核表达载体,并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法：采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人NKX2-3基因,将其克隆到Flag-pc DNA3.0载体中,酶切和测序验证后转染人胚肾293T细胞,蛋白免疫印迹鉴定其表达;转染人结肠癌细胞HCT-116和肝癌Hep G2细胞,通过CCK8法测定细胞生长曲线。结果：从人乳腺文库中扩增得到约1080 bp的DNA片段,并克隆至Flag-pc DNA3.0载体上,测序结果与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,目的基因获得表达;细胞
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