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目的
建立能同时检测抗HCV－免疫球蛋白(Ig)M和抗HCV－IgG抗体的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法。
方法采用HCV重组抗原包被，制备Eu3＋标记抗人IgM和Sm3＋标记抗人IgG抗体；采用间接法建立HCV－IgM和HCV－IgG TRFIA并行优化和方法学考核。用百分位数法单侧95%计算阳性判定(CO)值。
结果以1个样本检测值/阳性判定值(S/CO)为单位，HCV－IgM和HCV－IgG的检测灵敏度分别为0.06和0.15 S/CO。分别将HCV－IgM和HCV－IgG强阳性的标本从1∶12.5倍比稀释到1∶51 200，HCV－IgM在1∶12.5～1∶12 800呈较好线性反应，HCV－IgG在1∶25～1∶6 400呈较好线性反应。HCV－IgM和HCV－IgG的平均批内CV分别为3.37%和3.66%，平均批间CV分别为6.52%和6.75%。用酶联免疫吸附测定法作为参照，检测HCV阳性标本和阴性标本各20例，两者HCV－IgM阳性符合率为100.0%(20/20)，阴性符合率为90.0%(18/20)，总符合率为95.0%(38/40)；HCV－IgG相应数据分别为100.0%(20/20)、95.0%(19/20)和97.5%(39/40)。试剂盒于37 ℃放置7 d检测，荧光计数值分别下降11.1%和9.5%，稳定性能良好。
结论建立的HCV－IgM和HCV－IgG TRFIA双标记分析法1次测量可同时得到HCV－IgM和HCV－IgG结果，是一种宽量程、高特异性、高灵敏度、稳定性好的方法。