论文部分内容阅读
将能与血小板膜糖蛋白Ⅲa特异结合的单克隆抗体SZ－21构建成单链抗体。应用RT－PCR技术，从分泌SZ－21单克隆抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL可变区基因，并构建成SZ－21单链抗体（SZ－21ScFv)。将该单链抗体基因亚克隆到高效表达质粒pET20b，得到pET20b-21ScFv。通过IPTG诱导在大肠杆菌E coli BL21(DE3)PlysS中表达了功能分子。表达产物主要以包涵体形式存在，表达量占菌体蛋白的21％。经过包涵体的溶解、Ni-NTA树脂亲和吸附纯化和蛋白质的体外重折叠等一系列的