微滴数字PCR检测含有目的基因的PUC57质粒问题分析

来源 :国际检验医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jo0909

【摘要】

：

目的探讨微滴数字聚合酶链反应(ddPCR)检测含有目的基因的PUC57质粒过程中出现的问题及解决方法。方法用ECORⅠ酶37℃孵育含有目的基因的PUC57质粒2h和4h,然后65℃孵育20min,

【作者】

：

杨德平刘维薇

【机构】

：

上海健康医学院附属周浦医院检验科,上海市同济大学附属第十人民医院检验科,上海市皮肤病医院检验科

【出处】

：

国际检验医学杂志

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

微滴数字聚合酶链反应 PUC57质粒酶切

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(81370067、81572061);上海市新优青人才计划(XYQ2013095);上海申康医院发展中心辅助科室能力建设项目(SHDC22014006)

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目的探讨微滴数字聚合酶链反应(ddPCR)检测含有目的基因的PUC57质粒过程中出现的问题及解决方法。方法用ECORⅠ酶37℃孵育含有目的基因的PUC57质粒2h和4h,然后65℃孵育20min,灭活ECORⅠ酶。用伯乐QX200TM微滴式数字PCR分别检测PUC57质粒和经ECORⅠ酶酶切后的PUC57质粒,同时对酶切后的PUC57质粒分多天进行检测,对检测结果进行比较。结果含有目的基因的PUC57质粒经ECORⅠ酶酶切2h和4h后的检测值与质粒理论值之间差异无统计学意义(t=-0.192、-0.403

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