【摘 要】
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【目的】探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2在骨髓基质细胞(MSC)体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC,取第五代MSC行免疫荧光鉴定;免疫组化、RT-P
【机 构】
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昆明医学院第一附属医院神经外科; 云南省第二人民医院; 昆明医学院生物医学工程研究中心脑研究室; 新加坡国立大学解剖系 云南昆明650032; 云南昆明6500
【基金项目】
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新加坡国防部DSO基金资助(DSO20030208)
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【目的】探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2在骨髓基质细胞(MSC)体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC,取第五代MSC行免疫荧光鉴定;免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况;Boyden小室法检测趋化因子MCP-1(5～500ng/mL)对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究(脊髓全横断组24只,假手术组9只,正常大鼠9只),分别于术后1,3,7,14d取材,行免疫组化检测MCP-1表达,或行MCP-1的Real-timePCR定量分析,或颈内静脉注射荧光标记的MSC,观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin;细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2;MCP-1(5～500ng/mL)体外可趋化MSC迁移(P﹤0.05),抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用(P﹤0.05)。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1,但细胞分布、染色存在差异,影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义(P<0.05),术后14d时MCP-1RNA与正常对照相比差异无统计学意义(P>0.05),伴随其变化,脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义(P﹤0.05)。【结论】MCP-1体内、外可趋化MSC迁移,MCP-1/CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。
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