【摘 要】
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目的 建立过氧化氢(H2O2)诱导的原代黄素化卵泡颗粒细胞氧化应激模型.方法 收集2019年10月至12月于保定市妇幼保健院生殖医学科行体外受精患者取卵后废弃的卵泡液,经密度梯度离心收集卵泡颗粒细胞,进行培养.不同浓度H2O2处理颗粒细胞12 h,采用最大半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)建立颗粒细胞氧化应激损伤模型.以未加H2O2的颗粒细胞为对照组,通过测定模型组丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(sup
【机 构】
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071000河北保定,保定市妇幼保健院生殖医学科;071000河北保定,河北大学附属医院儿科
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目的 建立过氧化氢(H2O2)诱导的原代黄素化卵泡颗粒细胞氧化应激模型.方法 收集2019年10月至12月于保定市妇幼保健院生殖医学科行体外受精患者取卵后废弃的卵泡液,经密度梯度离心收集卵泡颗粒细胞,进行培养.不同浓度H2O2处理颗粒细胞12 h,采用最大半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)建立颗粒细胞氧化应激损伤模型.以未加H2O2的颗粒细胞为对照组,通过测定模型组丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平、雌二醇(estradiol,E2)分泌量和细胞周期,评价模型组是否建模成功.结果 使用IC50浓度H2O2=65 μmol/L,建立颗粒细胞氧化损伤模型.与对照组比较,模型组的MDA含量升高、SOD水平下降、E2分泌量下降、细胞周期表现为sub G1峰增高、G1/G0期和G2/M期的细胞数量减少(P＜0.05).结论 65 μmol/L H2O2处理颗粒细胞12 h,建立了稳定的颗粒细胞氧化应激损伤模型,为进一步开展颗粒细胞抗氧化研究提供了细胞模型.
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