【摘 要】
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本实验采用RT-PCR技术,应用高保真DNA聚合酶从人喉癌细胞中扩增端粒酶催化亚基活性中心基因片段,将克隆载体上hTERTcDNA用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,连入真核表达载体pCR3.1,利用
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,中国人民解放军军需大学兽医系
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本实验采用RT-PCR技术,应用高保真DNA聚合酶从人喉癌细胞中扩增端粒酶催化亚基活性中心基因片段,将克隆载体上hTERTcDNA用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,连入真核表达载体pCR3.1,利用pCR3.1载体上带有强的CMV启动子,高效表达活性中心蛋白,采用RT-PCR检测hTERT mRNA的表达情况,结果表明,在细胞内检测到了mRNA,证明该cDNA在细胞内确实得到了表达,并采用TRAP-ELISA方法检测端粒酶活性.
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