16SrRNA基因克隆文库用于菌群分析的效能研究和评价

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyan4321
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目的建立16SrRNA基因克隆文库进行菌群相对定量的方法,评价其对细菌的检测效率以及对混合菌群巾低含量细菌的分析能力。方法取脆弱类杆菌等9种细菌以相同及级差比例制备细菌悬液,分别用或不用变溶菌素处理后,用试剂盒提取核酸,16SrRNA基因通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序,建立16SrRNA基因克隆文库,将序列与数据库进行比对分析。结果相同比例制备的菌悬液,加或不加变溶菌素提取的核酸,掺入的9种细菌均可检出。级差比例制备的菌悬液,加变溶菌素提取核酸,掺入的9种细菌均可检出;不加变溶菌素提取核酸
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