海藻糖和胎牛血清对人乳腺细胞HBL-100低温保存的影响

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建立高质量的生物样本库至关重要,低温保存过程中保护剂的种类和浓度对样本的冷冻效果有很大影响。本文以人乳腺细胞HBL-100为研究对象,在Me2SO含量10%的DMEM溶液中分别添加不同浓度海藻糖(00.3 mol/L)和不同体积分数FBS(20%60%)。采用逐步降温法,先在-80℃冰箱中慢速降温4 h,再快速投入到液氮中(-196℃),冻存7 d后,在37℃水浴锅中快速摇晃复温。分别用台盼蓝法、CCK法和24 h贴壁率法检测细胞的成活率,结果表明:与对照组相比,海藻糖和FBS对细胞的冷冻效果都有显著影响。当海藻糖浓度一定时,FBS体积分数越高,细胞的冷冻效果越好,但不添加海藻糖时,FBS的作用不明显;当FBS体积分数一定时,三种检测指标在海藻糖浓度为0.2 mol/L时最优,且高浓度海藻糖可能会抑制FBS作用。考虑成本等因素,最适宜冻存人乳腺细胞HBL-100的冻存液为10%Me2SO+40%60%FBS+0.2 mol/L海藻糖。
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