目的探讨二氯化铺（CoCL）化学缺氧对瘢痕Fli整合素连接激酶（1LK）表达的影响，以及其对细胞增殖的影响。方法体外培养7例患肯增生性瘢痕FL，取第5～6代细胞进行实验。7例患者的Fh各取6瓶，分别加入含6种终浓度为0、50、100、150、200、250txnlol／LCoCl，的DMEM培养液培养24h，采用实时荧光定量PCR法检测ILKmRNA表达。选择最适CoCl，浓度（100μmol／L）进行缺氧刺激，观察ILK蛋白于CoCI，作用0、1、2、4、12、24h的表达。将细胞分为正常对照组、阴性对照组、ILK小f扰RNA（siRNA）组，分别将con—siRNA及ILKsiRNA转染入后2组细胞，对照组仅以培养液培养，24h后弃堵养液，置于含6种浓度CoCI，的培养液中培养24h。各组各浓度4个复孑L。采剧3，3’-[1-（苯氨酰摹）-3，4-四氮唑]．二（4．甲氧基-6-硝基）苯磺酸钠（XTT）法检测各组细胞增殖水平。埘数据进行单因素方差分析以及重复测量方差分析，多重比较采用LSD法。结果100Ixmol／LCoCI，作用24h时ILKmRNA表达最高，与其他浓度CoCI，作用的Fl】相比差异有统计学意义（F=50．958，P〈0．001）。100μmol／LCoCl，作用时蛋白表达量（0．243±0．009）较0h（0．387±0．017）降低，2h（0．36l±0．010）开始增高，4h（0．584±0．028）、12h（0．730±0．029）、24h（0．785±0．031）ILK蛋白表达强度逐渐增强。其1、4、12、24h的ILK篮白表达艟与0h牛日比差异具有统计学意义（P值均小于0．05）。结果显示，正常对组在100μmol／I。CoCI2作用时细胞增殖水平最高（F=488．026，P〈0．001），从150μmol／I．起细胞增殖水平开始下降，250μmol／1．时细胞增殖水平显格低于0-μmol／[时水平（P值均小于0．05）。ILKsiRNA组细胞增殖水平在各浓度CoCI，作用下无明显变化（F=2．542，P=0.056）。ILKsiRNA纰的细胞增殖水平显著低于正常对照组及阴性对照组（F=2519．542，P〈0．001）。结论ILK可能是FIK对缺氧应答的关键蛋白，轻度缺氧可以提高细胞ILK的表达，促进搬痕FLJ增殖；而承度缺氧可以降低ILK的表达，抑制细胞增殖。
二氯化钴化学缺氧诱导瘢痕成纤维细胞整合素连接激酶的表达及其对细胞增殖的影响
【摘 要】
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目的探讨二氯化铺（CoCL）化学缺氧对瘢痕Fli整合素连接激酶（1LK）表达的影响，以及其对细胞增殖的影响。方法体外培养7例患肯增生性瘢痕FL，取第5～6代细胞进行实验。7例患者的Fh各取6瓶，分别加入含6种终浓度为0、50、100、150、200、250txnlol／LCoCl，的DMEM培养液培养24h，采用实时荧光定量PCR法检测ILKmRNA表达。选择最适CoCl，浓度（100μmol／L
【机 构】
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暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤整形科,广州510220,暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤整形科,广州510220,暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤整形科,广州510220,暨南大学附属广州市红
【发表日期】
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2013年29期
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