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目的：探索影响针刺效应的主次因素和针刺参数的最佳组合,以期为提高针刺疗效、指导针灸临床提供理论依据。方法：采用L9（34）正交表对影响针刺效应的4因素（穴位的选择、捻针角度、捻针频率、捻针时间）3水平安排试验,运用计算机控制针刺手法仪治疗肾阳虚大鼠,通过酶联免疫检测血清T、E2和实时荧光定量PCR检测垂体中LH、FSH mRNA表达的水平来比较上述4因素的主次。结果：上述4因素对针刺效应的影响大小依次是穴位选择、捻针角度、捻针频率、捻针时间,其中腧穴的选择是影响针刺效应的重要因素（P〈0.05）;捻针角度