基于循环肿瘤细胞的基因标志物对转移性前列腺癌的诊断价值

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huanying19870604
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

以转移性前列腺癌患者为研究对象,探讨基于循环肿瘤细胞(CTCs)的前列腺癌相关基因标志物,用于转移性前列腺癌的诊断。

方法

通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术对人前列腺癌细胞(LNCap)中人激肽释放酶相关酶2(KLK2)、人激肽释放酶相关酶3(KLK3)、叉头框蛋白A1(FOXA1)、粒状头样转录因子2(GRHL2)及同源盒B13(HOXB13)5个基因的表达进行检测,建立多基因表达的联合检测的方法。采集30例转移性前列腺癌患者和20例健康志愿者的血液样本,利用血液样本和前列腺癌细胞对检测方法的一致性、重复性、线性和灵敏度方面进行了评估。通过比较患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果,确定前列腺癌相关标志基因表达水平对于患者预后的意义。

结果

该联合检测方法中各基因表达水平与单基因表达水平具有一致性;5个基因表达量在LNCap RNA不同稀释浓度(1 pg~1 μg)的对数范围内呈现较明显的线性关系:KLK2(0.995)、KLK3(1.000)、FOXA1(0.992)、GRHL2(0.999)、HOXB13(1.000);各基因检测浓度范围分别是KLK2(5 pg~1 μg)、KLK3(1 pg~1 μg)、FOXA1(10 pg~1 μg)、GRHL2(100 pg~1 μg)、HOXB13(100 pg~1 μg);患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果对比显示两者具有相关性,即CTCs计数越高的患者,其基因表达阳性率也越高。

结论

KLK2、KLK3、FOXA1、GRHL2及HOXB13 5个基因表达水平的联合检测方法具有操作更简单便捷的技术优势和较好的准确性和灵敏度。

其他文献
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-214在前列腺癌中的表达及其生物学功能。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测36例前列腺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-214的表达。在人前列腺癌细胞株DU145中转染miR-214模拟物miR-214 mimic,阴性对照miR-214-nc。采用噻唑蓝(MTT)法检测过表达miR-214后DU145细胞的增殖能力,采用小室(
期刊
目的探讨脂肪非典型钙黏蛋白(FAT1)通过靶向调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)调节缺氧条件下胶质瘤细胞侵袭能力的作用机制。方法选择我院收治的48例Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤患者的手术病理组织样本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测FAT1和HIF-1α表达水平并分析其相关性。以人胶质瘤细胞U87MG和GOS3作为研究对象,采用FQ-PCR技术检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1
目的观察干扰谷氨酰胺酶1(GLS1)表达对人胃肠道神经内分泌肿瘤细胞生物学特性的影响。方法Western blot检测GLS1在人胃肠道神经内分泌肿瘤中的表达;将正常对照(NS)-小干扰RNA(siRNA)、GLS1-siRNA1、GLS1-siRNA2、GLS1-siRNA3转染人胃肠道神经内分泌肿瘤细胞株BON-1,未转染任何siRNA的作为对照组,Western blot检测转染后各组细胞中
目的观察膜联蛋白A11(ANXA11)对人胃癌细胞株SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性影响。方法检测人胃癌细胞株SCG7901、BGC823的ANXA11表达。将ANXA11-小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列瞬时转染入SGC7901细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染后各组细胞对不同剂量5-Fu(1、10、20、40、80 μg/ml)的药物敏感性改变。应用流式细胞
目的探讨中低位直肠癌术后预防性肠造口不能回纳的危险因素。方法分析我院315例中低位直肠癌住院病例。χ2检验分析造口类型与临床病理变量之间的关系。用Kaplan-Meier生存曲线分析永久性造口的预测因素。用Cox比例风险回归法对危险因素进行评估。结果在315例患者中,127例行预防性造口,其中116例行末端回肠袢式造口,11例行结肠造口。其中94例回肠造口术后予回纳,造口到回纳间隔时间的中位值为6
目的观察乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在肝癌组织的表达与临床病理特征的关系及其表达的抑制对肝癌细胞增殖凋亡的影响。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌组织中BCRP表达,并分析其与临床病理特征的关系;通过Lipofectamine™2000脂质体介导法将BCRP-小干扰RNA(siRNA)转染人肝癌SMMC-7721细胞,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪及Western blot分别
目的检测儿童类风湿关节炎亚型(S-JIA、JIA少关节型)外周血Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白-3(NLRP-3) mRNA基因表达差异,探讨NLRP-3 mRNA表达水平差异与患儿临床表现特征的相关性。方法收集28例初治类风湿关节炎(S-JIA13例,JIA少关节型15例)住院患儿及20例同期正常体检患儿的外周血标本,提取标本总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外
目的检测膜突蛋白(Moesin)和胸苷激酶1 (TK1)在大肠癌组织中的表达水平,分析其与大肠癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测75例大肠癌组织和大肠癌癌旁组织中Moesin和TK1表达水平。结果大肠癌组织中Moesin阳性表达率明显高于癌旁组织(68.00%比21.33%,t=33.043,P=0.000),Moesin表达水平与与大肠癌组织学分化程度、TNM分期和淋巴结转移明
目的观察膜联蛋白A9(ANXA9)在人结肠癌细胞株SW620增殖中发挥的作用,并探讨其机制。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9的表达;应用40 nmol/L的ANXA9-小干扰RNA(siRNA)转染ANXA9表达最强的SW620细胞株,抑制内源性ANXA9的表达;