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【摘要】将百合鳞片的不同部位接种于加油不同激素和不同浓度BA和NAA的6种培养基上，一周后接种的百合鳞片开始变绿，2周后，鳞片的受伤部位出现绿色的愈伤组织,，再经2—3周培养，产生愈伤组织的部位逐渐形成小鳞茎，并开始有叶片长出。其中2号培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L的分化率最高。实验结果表明，鳞片的不同部位分化能力也有差异，其中下部分化效果最好；激素6-BA和NAA浓度的配比，与鳞片分化小鳞茎的速度、数量和质量有着重要的关系。
【关键词】百合；鳞茎；组织培养
1.百合的简介
百合是百合科百合属（LiliumL.）各个种、杂交种、园艺品种的总称。它是著名的球根花卉，其地下部分为众多肥厚鳞片组成的鳞茎。百合花花姿优美，花大色艳，历来深受世界各国人民的喜爱，为世界名贵切花之一，广泛用于盆栽、花坛、花境及专类园。从考古文物中发现百合花用作观赏已有三千六百五十多年的历史。此外，多种百合的鳞茎、茎、花、种子均可入药，百合的鳞茎及花营养丰富，可制作多种美味佳肴。芳香的百合可提取芳香油制成香料。全世界百合属植物约一百种，起源于我国的就有四十七种和十八个变种，占世界百合属植物的一半以上。
1.1实验目的和意义
传统的花卉繁殖是靠播种、扦插、分株、压条、嫁接这些措施来实现的，然而在花卉业迅猛发展的今天，传统的育种技术已经无法满足生产需要，因而人们对花卉的繁殖技术提出了更高的要求。在世界各国植物生理工作者的努力下，利用组织培养进行花卉繁殖的技术日趋成熟。目前已有很多花卉可以利用组织培养为花卉提供种苗。今天，我们所享用的花卉产品之所以能够如此之高的品质，与花卉组织培养的应用不无关联。
百合植物资源丰富，栽培历史悠久，花色多样，它不仅适用于庭院栽培，布置花境，也可盆栽观赏，并早已成为花卉研究领域的佼佼者。百合虽然观赏性很高，但大多抗性很弱，尤其抗寒性。一般在东北地区种植商品百合时，每年秋季必须起球，窖藏或者冷库存放，这大大增加了百合的生产成本，限制了东北地区花卉业的发展。随着百合在国内外鲜切花市场的走俏，百合花生产和消费逐年增加，但由于百合种球繁殖率底，病毒侵染造成退化，难于满足切花生产需要。目前主要采用组织培养进行百合脱毒和快繁，以促进百合商品种球的生产。但是百合试管苗小鳞茎较小，结鳞茎时间较长，移植成活率低，制约了工厂化商品生产。
目前国内繁殖百合主要通过进口鳞茎进行繁殖。但是市场售价较高，而且有时鳞茎质量难以保证、繁殖率低易造成鳞茎退化。采用组织培养的方法在很短时间内可以得到大量的组培苗，而且一般在第二年即可开花。本实验旨在采用组织培养的方法，用MS附加不同激素浓度的培养基进行对比实验，寻找出适合百合鳞茎分化的培养基，达到快速繁殖的目的，成苗速度快，成本低，适用于工厂化生产。克服北方气候不利因素，为百合在北方迅速推广奠定基础。
2.实验材料和方法
2.1实验材料
多年生百合鳞茎。
2.2实验方法
2.2.1材料的预处理
为加快鳞茎的分化速度，在接种前选择健壮无病的鳞茎放在4℃低温下处理一周。取出后剥去外部一层鳞叶（因最外层鳞叶所携带的细菌与病毒较多），然后将其放入洗衣粉水内泡20分钟，取出后先用自来水冲洗干净，在用蒸馏水冲洗2—3遍后放至超净工作台内。
2.2.2材料的灭菌与接种
用75%酒精将材料浸泡30秒钟，取出后用无菌水冲洗2—3次，再放入0.1%氯化汞溶液中浸泡十分钟，其间不断搅拌，使其灭菌彻底。最后用无菌水漂洗3—5遍。然后用无菌滤纸吸干鳞片表面的水分，再将切口处接触过消毒剂的部分剪掉，然后将鳞片分为上、中、下三段切成5mm×5mm的小块，分别接种在六种不同激素浓度的培养基上（6种培养基配方见2.3），每种培养基和不同的鳞片的部位分别接种3瓶，每瓶内接种5块。
2.2.3培养条件
将接完种的培养材料放入培养室，培养温度23—25℃，每天光照14小时，湿度60—70%，光源为日光灯。
2.3培养基成分
6种分化培养基如下。
１．MS+6-BA1mg/L+NAA0.02mg/L
２．MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/
３．MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L
４．MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/
５．MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L
６．MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L
以上培养基均加有3%的蔗糖和0.9%的琼脂，pH值为5.6-5.8，然后用高压灭菌锅在122℃条件下灭菌12-15分钟。
3.结果与分
3.1鳞片分化结果
接种7天后，鳞片切口边缘处变成褐色，鳞片表面变绿，接种两周后，切块的边缘上诱导出淡黄色的不定芽原基，呈颗粒状突起，这些不定芽原基继续生长，长成绿白色的小鳞茎。
3.2百合鳞片在不同激素组合的培养基上分化结果
本实验以多年生百合的鳞茎鳞片为外植体，共设6个组合进行组织培养实验。结果表明，激素在实验浓度范围内对鳞片培养结果影响不大。6个组合均可诱导百合鳞片分化小鳞茎，在一定激素浓度范围内百合鳞片都能分化小鳞茎。不同激素组合对百合鳞片分化小鳞茎能力有明显影响，但各个组合的分化率不同，其中以MS+6-BA1mg/+NAA0.1mg/L較为适合，分化率为48.89%。分化结果见表1。
表1不同激素组合对百合鳞片分化小鳞茎能力的影
表2 鳞片分割对小鳞茎的影响
3.3不同部位的鳞片分化结果
将鳞片切割成三段，比较鳞茎不同部位的分化情况。从鳞片分化小鳞茎数量看，以下部切段为最多，其次中部切段，上部切段最少：也就是说，上部切段分化能力低，中部和下部切段分化能力强。结果见表2。
4.结论
（1）利用百合鳞片进行组织培养的结果表明，百合鳞片的离体繁殖在工厂化育苗中有很好的育苗前景。影响百合鳞片的诱导因素是多方面的，百合的不同品种，鳞片的年龄、位置、培养基中的激素种类及用量均与组培效果有密切关系。因此，在供试的品种快速繁殖中应考虑使用激素的质量和浓度。（2）鳞片不同部位分化小鳞茎能力也有较大差异，鳞片基部分化能力最强，中部次之，上部最差。因此，工厂化育苗拟采用鳞片中、下部培养。（3）在激素组合的优化选择中，BA、NAA是首选常用激素，它们效果好、价格相对便宜。最适合百合鳞片分化小鳞茎的激素组合为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L。■
【关键词】百合；鳞茎；组织培养
1.百合的简介
百合是百合科百合属（LiliumL.）各个种、杂交种、园艺品种的总称。它是著名的球根花卉，其地下部分为众多肥厚鳞片组成的鳞茎。百合花花姿优美，花大色艳，历来深受世界各国人民的喜爱，为世界名贵切花之一，广泛用于盆栽、花坛、花境及专类园。从考古文物中发现百合花用作观赏已有三千六百五十多年的历史。此外，多种百合的鳞茎、茎、花、种子均可入药，百合的鳞茎及花营养丰富，可制作多种美味佳肴。芳香的百合可提取芳香油制成香料。全世界百合属植物约一百种，起源于我国的就有四十七种和十八个变种，占世界百合属植物的一半以上。
1.1实验目的和意义
传统的花卉繁殖是靠播种、扦插、分株、压条、嫁接这些措施来实现的，然而在花卉业迅猛发展的今天，传统的育种技术已经无法满足生产需要，因而人们对花卉的繁殖技术提出了更高的要求。在世界各国植物生理工作者的努力下，利用组织培养进行花卉繁殖的技术日趋成熟。目前已有很多花卉可以利用组织培养为花卉提供种苗。今天，我们所享用的花卉产品之所以能够如此之高的品质，与花卉组织培养的应用不无关联。
百合植物资源丰富，栽培历史悠久，花色多样，它不仅适用于庭院栽培，布置花境，也可盆栽观赏，并早已成为花卉研究领域的佼佼者。百合虽然观赏性很高，但大多抗性很弱，尤其抗寒性。一般在东北地区种植商品百合时，每年秋季必须起球，窖藏或者冷库存放，这大大增加了百合的生产成本，限制了东北地区花卉业的发展。随着百合在国内外鲜切花市场的走俏，百合花生产和消费逐年增加，但由于百合种球繁殖率底，病毒侵染造成退化，难于满足切花生产需要。目前主要采用组织培养进行百合脱毒和快繁，以促进百合商品种球的生产。但是百合试管苗小鳞茎较小，结鳞茎时间较长，移植成活率低，制约了工厂化商品生产。
目前国内繁殖百合主要通过进口鳞茎进行繁殖。但是市场售价较高，而且有时鳞茎质量难以保证、繁殖率低易造成鳞茎退化。采用组织培养的方法在很短时间内可以得到大量的组培苗，而且一般在第二年即可开花。本实验旨在采用组织培养的方法，用MS附加不同激素浓度的培养基进行对比实验，寻找出适合百合鳞茎分化的培养基，达到快速繁殖的目的，成苗速度快，成本低，适用于工厂化生产。克服北方气候不利因素，为百合在北方迅速推广奠定基础。
2.实验材料和方法
2.1实验材料
多年生百合鳞茎。
2.2实验方法
2.2.1材料的预处理
为加快鳞茎的分化速度，在接种前选择健壮无病的鳞茎放在4℃低温下处理一周。取出后剥去外部一层鳞叶（因最外层鳞叶所携带的细菌与病毒较多），然后将其放入洗衣粉水内泡20分钟，取出后先用自来水冲洗干净，在用蒸馏水冲洗2—3遍后放至超净工作台内。
2.2.2材料的灭菌与接种
用75%酒精将材料浸泡30秒钟，取出后用无菌水冲洗2—3次，再放入0.1%氯化汞溶液中浸泡十分钟，其间不断搅拌，使其灭菌彻底。最后用无菌水漂洗3—5遍。然后用无菌滤纸吸干鳞片表面的水分，再将切口处接触过消毒剂的部分剪掉，然后将鳞片分为上、中、下三段切成5mm×5mm的小块，分别接种在六种不同激素浓度的培养基上（6种培养基配方见2.3），每种培养基和不同的鳞片的部位分别接种3瓶，每瓶内接种5块。
2.2.3培养条件
将接完种的培养材料放入培养室，培养温度23—25℃，每天光照14小时，湿度60—70%，光源为日光灯。
2.3培养基成分
6种分化培养基如下。
１．MS+6-BA1mg/L+NAA0.02mg/L
２．MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/
３．MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L
４．MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/
５．MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L
６．MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L
以上培养基均加有3%的蔗糖和0.9%的琼脂，pH值为5.6-5.8，然后用高压灭菌锅在122℃条件下灭菌12-15分钟。
3.结果与分
3.1鳞片分化结果
接种7天后，鳞片切口边缘处变成褐色，鳞片表面变绿，接种两周后，切块的边缘上诱导出淡黄色的不定芽原基，呈颗粒状突起，这些不定芽原基继续生长，长成绿白色的小鳞茎。
3.2百合鳞片在不同激素组合的培养基上分化结果
本实验以多年生百合的鳞茎鳞片为外植体，共设6个组合进行组织培养实验。结果表明，激素在实验浓度范围内对鳞片培养结果影响不大。6个组合均可诱导百合鳞片分化小鳞茎，在一定激素浓度范围内百合鳞片都能分化小鳞茎。不同激素组合对百合鳞片分化小鳞茎能力有明显影响，但各个组合的分化率不同，其中以MS+6-BA1mg/+NAA0.1mg/L較为适合，分化率为48.89%。分化结果见表1。
表1不同激素组合对百合鳞片分化小鳞茎能力的影
表2 鳞片分割对小鳞茎的影响
3.3不同部位的鳞片分化结果
将鳞片切割成三段，比较鳞茎不同部位的分化情况。从鳞片分化小鳞茎数量看，以下部切段为最多，其次中部切段，上部切段最少：也就是说，上部切段分化能力低，中部和下部切段分化能力强。结果见表2。
4.结论
（1）利用百合鳞片进行组织培养的结果表明，百合鳞片的离体繁殖在工厂化育苗中有很好的育苗前景。影响百合鳞片的诱导因素是多方面的，百合的不同品种，鳞片的年龄、位置、培养基中的激素种类及用量均与组培效果有密切关系。因此，在供试的品种快速繁殖中应考虑使用激素的质量和浓度。（2）鳞片不同部位分化小鳞茎能力也有较大差异，鳞片基部分化能力最强，中部次之，上部最差。因此，工厂化育苗拟采用鳞片中、下部培养。（3）在激素组合的优化选择中，BA、NAA是首选常用激素，它们效果好、价格相对便宜。最适合百合鳞片分化小鳞茎的激素组合为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L。■