COX-2和FHIT在非小细胞肺癌中的表达和相关性的研究

来源 :中国医学创新 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaixin0322
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【摘要】 目的 探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中FHIT和COX-2蛋白的表达相关性及其与肺癌发展之间的关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测57例NSCLC组织及6例良性病变肺组织中FHIT和COX-2蛋白的表达。结果 NSCLC组织FHIT和COX-2蛋白的阳性表达率分别为22.80%和82.46%。FHIT在NSCLC组织中表达缺失,与肿瘤的组织分型、TNM分期和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。COX-2在NSCLC组织中高表达与肿瘤的组织分型、TNM分期、肿瘤大小及分化程度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。癌组织中FHIT和COX-2蛋白的表达呈显著负相关(r0.342,P0.004)。结论 FHIT和COX-2蛋白在非小细胞肺癌中表达成显著负相关,提示两者在非小细胞肺癌的发生发展中可能存在重要的协同作用。 【关键词】 FHIT; COX-2; 非小细胞肺癌; 免疫组织化学 Study on the expression and correlation of FHIT and COX-2 in non-small cell lung cancer 1YANG Yong-shan, WANG Yan.1The Third Clinical Hospital of Harbin Medical University, Daqing, 163318, China 【Abstract】 Objective To investigate the correlation of the expression of FHIT and COX-2 proteins and study its role in the development of non-small cell lung cancer (NSCLC).Methods The expression of FHIT and COX-2 proteins was detected by SP immunohistochemical technique in 57 cases of non-small cell lung cancer and 6 cases of benign lung lesions.Results The positive rates of FHIT and COX-2 proteins were 22.80% and 82.46% respectively in NSCLC. Reduction of FHIT had no relation to the sex or age of the patients, sizes of tumors and tumor differentiation(P>0.05).The expression of FHIT was closely related to the types of histology, stages of TNM and lymph node metastasis(P<0.05).The expression of COX-2 was not related to the sex or age of the patients (P>0.05). The expression of COX-2 was closely related to the types of histology, stages of TNM, sizes of tumors, tumor differentiation and lymph node metastasis(P<0.05). The expression of FHIT protein has a significant negaitive correlation with that of COX-2 protein in NSCLC(r0.342, P0.009).Conclusion There is a significant negative correlation between high expressions of FHIT and COX-2 proteins in NSCLC. The high expressions of FHIT and COX-2 proteins are possibly related to the development and metastasis of NSCLC. 【Key words】 FHIT; COX-2; Non-small lung cancer; Immunohistochemistry 肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率逐年增加,其中非小细胞肺癌占大多数。细胞癌变是多因素、多阶段、多基因变异的结果。FHIT基因为多种肿瘤的候选抑癌基因,其表达频繁地降低或缺失,在细胞增殖、转化及肿瘤发生中具有十分重要的作用[1,2]。COX-2是可诱导型表达蛋白,与肿瘤的发生和发展有着密切关系[3]。已知两种基因与肺癌的发生发展密切相关,但两者在肺癌中表达的相关性尚未见报道。本研究旨在探讨FHIT蛋白和COX-2蛋白的表达相关性及其与非小细胞肺癌发生发展的关系。 1 材料与方法 1.1 标本来源 标本随机取自哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理科2000~2002年经肺部手术切除的NSCLC组织蜡块57例和良性病变肺组织蜡块6例。所有材料均经福尔马林固定,常规石蜡包埋,4 μm后连续切片,常规染色后,复查病理诊断,并按WHO标准分型、分级。其中腺癌26例,鳞癌27例,其它4例;良性病变肺组织6例;高、中、低分化分别为16、11和30例;按肿瘤大小分为D≤3 cm和D>3 cm组,分别为23和34例;其中男38例,女性19例;年龄最小30岁,最大79岁,按年龄分为<60岁和≥60 岁两组,分别为30和27例,平均58岁;所有病例均有淋巴结转移情况记录,其中转移者19例。临床分期依据1997年国际抗癌联盟(UICC)TNM分期标准,其中Ⅰ~Ⅱ期16例,Ⅲ期41例。所有病例术前均未接受放疗、化疗。 1.2 试剂及染色法 COX-2多克隆抗体(兔抗)及链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化染色试剂盒均为美国Santa Cruz公司产品;FHIT多克隆抗体(兔抗)和Envision试剂盒均为Zymed公司产品,均购自北京中山生物技术有限公司。用免疫组化SP法。实验步骤按SP试剂盒说明书进行,DAB显色。将已知阳性的肺癌切片作为阳性对照,用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照。 1.3 结果判定 FHIT和COX-2阳性反应产物均呈棕黄色颗粒状,定位在细胞浆中。参照有关文献[4],每张切片随机选取10个高倍视野,每个高倍视野计数100个癌细胞,计算阳性细胞百分率,结果判定采用盲法,并由病理科医师对染色结果复阅核定。判定标准: (1)阴性(-):阳性细胞数<5%;(2)弱阳性(+):阳性细胞数在5%~25%之间, 染色淡;(3)中度阳性(++):阳性细胞数26%~50%之间, 染色清晰;(4)强阳性(+++): 阳性细胞数>50%,染色强。 1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0 统计软件进行分析,组间比较采用χ2检验及Fisher确切概率法, 相关性分析采用Spearman等级相关分析,结果均以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 FHIT和COX-2在NSCLC和肺良性病变组织中的表达 如表1所示,57例NSCLC标本中,FHIT蛋白阳性表达13例,阳性率22.80%;COX-2蛋白阳性表达47例,阳性率82.46%。6例良性病变肺组织标本中FHIT蛋白全部阳性表达,COX-2蛋白全部阴性表达。两组标本中的FHIT和COX-2表达差异有统计学意义(P<0.05)。 表1 FHIT和COX-2在NSCLC和肺良性病变组织中的表达 2.2 FHIT和COX-2蛋白表达与NSCLC临床病理特征的关系 由表2可知,在NSCLC组织中,FHIT在NSCLC组织中表达缺失,与肿瘤的组织分型、TNM分期和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。COX-2在NSCLC组织中高表达,与肿瘤的组织分型、TNM分期、肿瘤大小及分化程度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。 表2 FHIT和COX-2表达与NSCLC临床病理参数的关系 2.3 NSCLC组织中FHIT和COX-2表达的相关性 由表3可见,57例NSCLC组织中,Spearman 等级相关分析显示FHIT和COX-2表达呈显著负相关(r0.342,P0.004)。 表3 NSCLC 组织中FHIT和COX-2蛋白表达的相关性 注:r0.342,P0.004 3 讨论 脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因是于1996年首次克隆出的一个新的候选抑癌基因,其定位于染色体3p14.2,跨越人类基因组中一个最普遍的脆性位点FRA3B及肾细胞癌相关性断裂点t。大量研究表明,FHIT基因在肺癌等肿瘤中均存在异常。本实验研究发现,FHIT在NSCLC组织中表达缺失,与肿瘤的组织分型、TNM分期和淋巴结转移关系密切,与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关。 环氧化酶是由两种基因型,即COX-1 和COX-2组成的催化前列腺素合成的限速酶。其中COX-2在大多数组织正常生理条件下并不存在,仅在细胞受到刺激时迅速合成,催化花生四烯酸产生多种前列腺素类物质,通过多种途径,参与包括炎症、肿瘤等多种病理生理过程。研究表明,COX-2在NSCLC组织中高表达与肿瘤的组织分型、TNM分期、肿瘤大小及分化程度和淋巴结转移关系密切,与患者的性别、年龄无关。 两者在肺癌中的相关性尚未见报道。本实验中57例肺癌组织中有FHIT大量表达缺失同时COX-2高表达,呈明显的负相关(r0.342,P0.004),提示两者在非小细胞肺癌的发生、发展中可能存在重要的协同作用,两者的联合检测可能对肺癌的诊治及预后有重要意义,可能会成为肺癌的靶向治疗的新目标,但需进一步的研究来探讨两基因间的具体作用机制。 参 考 文 献 [1] Lee YC, Wu CT, Shih JY, et al. Frequent allelic deletion at the FHIT locus assosiate with p53 overexpression in squamous cell carcinoma subtype of Taiwanese non-small-cell lung cancers. Br J Cancer, 2004, 90(12): 2378-2383. [2] Pekarsky Y, Palamarchuk A, Huebner K, et al. FHIT as tumou supperssor: mechanisms and therapeutic opportunitiesp. Cancer Biol Ther, 2002, 1(3): 232-236. [3] 王志伟,范向军,朱铭岩,等.PFC,TNF-α和NO在猪胰腺移植急性排斥反应中的意义.中国普通外科杂志,2004,12(10):754. [4] Hao XP, Willis JE,Pretlow TG, et al. Loss of fragile histidine triad expression in colorectal carcinomas and premalignant lesions. Cancer Res, 2000, 60(1): 18-21. (收稿日期:2011-05-25) (本文编辑:车艳)
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