可随HeLa细胞传代而传递的反义RNA真核表达系统

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ren_lian

【摘要】

：

为研究反义ＲＮＡ表达载体在细胞内的稳定性，构建了一个特异性针对β地中海贫血基因ＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ突变ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体ｐＣＭＶＡ．ｐＣＭＶＡ转染β＾６５４ＨｅＬａ细胞后，通过ＲＮＡ定量检测反义片段对β＾６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用

【作者】

：

陈云弟顾小锋

【机构】

：

上海市儿童医院上海医学遗传研究所

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

1999年2期

【关键词】

：

Β地中海贫血反义RNA 剪接基因治疗 βthalassemia Antisense RNA Splicing Gene therapy

【基金项目】

：

国家自然科学基金,上海生命科学研究中心研究基金

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为研究反义ＲＮＡ表达载体在细胞内的稳定性，构建了一个特异性针对β地中海贫血基因ＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ突变ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体ｐＣＭＶＡ．ｐＣＭＶＡ转染β＾６５４ＨｅＬａ细胞后，通过ＲＮＡ定量检测反义片段对β＾６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用；再从转染生传代５次并冰冻保存１年的ＨｅＬａ细胞中回收反义表达载体，转染另外的β＾６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用；再从转染后传代５次

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