突变K—ras基因siRNA腺病毒载体的构建及其对人肺腺癌细胞株H441的影响

来源 :中国肿瘤临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wjg12322

【摘要】

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目的：构建含12密码子点突变的K-ras基因siRNA腺病毒载体,并研究其对人肺腺癌细胞株H441中突变K-ras基因表达的影响。方法：首先构建含有K-ras^V12 siRNA的人H1启动子真核表达载

【作者】

：

张志平姜冠潮杨帆周足力王俊

【机构】

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济南市中心医院胸外科,北京大学人民医院胸外科

【出处】

：

中国肿瘤临床

【发表日期】

：

2007年9期

【关键词】

：

SIRNA 突变K—ras基因腺病毒H441细胞 RNA Small interfering Mutant K-ras Adenovirus vector H

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目的：构建含12密码子点突变的K-ras基因siRNA腺病毒载体,并研究其对人肺腺癌细胞株H441中突变K-ras基因表达的影响。方法：首先构建含有K-ras^V12 siRNA的人H1启动子真核表达载体pSilencerH1/siK-ras^V12;利用EcoRⅠ与HindⅢ双酶切将人H1载体启动子和K-ras^V12 siRNA序列亚克隆至经相同酶切的腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,形成转移质粒pAdTrack-H1/siK-ras^V12,然后与腺病毒骨架质粒pAd/PL共转染至大肠杆菌BJ518

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