羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的作用机制初步研究

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目的 研究羟基喜树碱 (HCPT)诱导胃癌细胞的凋亡作用及对凋亡相关基因 p5 3、c myc、bcl 2、bcl xl和bcl xs表达的影响 ,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法 应用TUNEL染色、流式细胞仪、免疫组化和RT PCR技术等研究HCPT对胃癌细胞SGC - 790 1和MKN 45的诱导凋亡作用和对凋亡相关基因表达的影响。结果 HCPT作用于细胞后 ,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化 :细胞核固缩 ,染色质凝集 ,呈新月型紧贴于核膜周边 ,核碎裂 ,染色质片段化 ,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。流式细胞仪计数显示 ,10 μg/ml的HCPT诱导胃癌细胞SGC 790 1和MKN 45的凋亡率为 2 1.88%和 12 .34%。TUNEL染色法显示 ,细胞凋亡指数在1.86 %~ 9.5 4%之间。免疫组化和RT PCR结果显示 :HCPT能够明显下调SGC 790 1细胞的 p5 3和bcl 2基因的蛋白和mRNA表达 ;对SGC 790 1细胞的c myc、bcl xl和bcl xs基因的蛋白表达无影响。HCPT作用后MKN 45细胞的p5 3蛋白和mRNA的表达增加 ;对MKN 45细胞的bcl 2、c myc、bcl xl和bcl xs基因的表达无影响。结论 HCPT能够诱导胃癌细胞凋亡 ,可能是通过调控胃癌细胞的 p5 3和bcl 2的表达而诱导胃癌细胞凋亡。
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