猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxIA基因在大肠杆菌中的融合表达与纯化

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选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apxIA基因序列中的抗原决定簇集中的区域,采用PCR方法从APP血清1型参考株259的基因组DNA中,扩增apxIA基因中约954bp的片段,连接到pMD-18T载体,经测序正确后,以EcoRI和NotI双酶切,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌DH5α,经0.4mmol/LIPTG诱导表达,产物通过尿素变性复性,并以Glutathione Sepharose 4B亲和层析的方法对目的蛋白进一步纯化。SDS-PAGE分析结果显示,目的基因在大肠杆
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