【摘 要】
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选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apxIA基因序列中的抗原决定簇集中的区域,采用PCR方法从APP血清1型参考株259的基因组DNA中,扩增apxIA基因中约954bp的片段,连接到pMD-18T载
【机 构】
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广西兽医研究所生物技术实验室,广西大学动物科技学院预防兽医系
【基金项目】
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广西科技攻关项目资助(No.桂科攻0537008-3B),广西区水产畜牧局科研计划(No.桂渔牧科061910),新世纪百千万人才工程国家级人选专项资金项目(No.945200603)
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选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apxIA基因序列中的抗原决定簇集中的区域,采用PCR方法从APP血清1型参考株259的基因组DNA中,扩增apxIA基因中约954bp的片段,连接到pMD-18T载体,经测序正确后,以EcoRI和NotI双酶切,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌DH5α,经0.4mmol/LIPTG诱导表达,产物通过尿素变性复性,并以Glutathione Sepharose 4B亲和层析的方法对目的蛋白进一步纯化。SDS-PAGE分析结果显示,目的基因在大肠杆
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