血管生成素相互作用蛋白的发现及其在哺乳动物细胞中的验证

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yxsaisai

【摘要】

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通过RT-PCR从人外周血白细胞中钓取血管生成素(angiogenin,Ang)cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS-2-1-Ang,对其自身转录激活活性进行鉴定后,通过酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库

【作者】

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徐东刚马百坤李莉邹民吉彭善云王嘉玺

【机构】

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军事医学科学院基础医学研究所,南京军区总医院全军医学检验中心,大连医科大学第二附属医院血液科

【出处】

：

生物化学与生物物理进展

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

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血管生成素相互作用蛋白哺乳动物细胞验证酵母双杂交免疫共沉淀肿瘤新生血管生成 angiogenin yeast twohybrid system

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通过RT-PCR从人外周血白细胞中钓取血管生成素(angiogenin,Ang)cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS-2-1-Ang,对其自身转录激活活性进行鉴定后,通过酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库,获得两个双阳性克隆.序列分析和同源检索表明所获候选蛋白分别为人上皮细胞素和λ晶体蛋白.构建Ang及候选蛋白标签融合表达载体并共转染COS-7细胞,利用免疫共沉淀和蛋白质印迹方法在哺乳动物细胞中验证了Ang与候选蛋白间的相互作用.为阐明Ang促血管新生的分子机制创造了条件.

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