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目的：构建Smad4基因RNAi慢病毒载体．方法：针对已经筛选确定的Smad4基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的Oligo DNA，退火形成双链DNA，与经Mlu Ⅰ和ClaⅠ酶切后的pLVTHM载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白（GFP）]连接产生LV-shSmad4慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定．用LV-shSmad4，pCMV-dR8．74和pMD2G3质粒共转染包装细胞293T细胞，包装产生慢病毒，以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度．结果：PCR和测序证实，成功构建Smad4