鸭 RLRs 和 IFN 基因 SYBR GREENⅠ实时荧光定量PCR 检测方法的建立

来源 :福建农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong584
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首次建立以 GAPDH 为内参,同时检测鸭 RIG-I 、MDA5、IFN-α和 IFN-γ等4种 mRNA 相对表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 方法(RT-FQ-PCR)。以目的基因的克隆质粒为标准品,建立标准曲线,并进行熔解曲线、重复性及稳定性分析。该方法 Ct 值线性范围为12.0~32.0;目的基因(RIG-I 、MDA5、IFN-α、IFN-γ)和内参基因(GAPDH)的扩增效率均在95%~105%,其相关系数均在0.99以上;扩增产物的熔解曲线都只出现1个特异性单峰,无引物
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