人白细胞介素-17F基因克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :苏州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：chensheng76

【摘要】

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目的克隆人白细胞介素-17F基因,并构建含有该目的基因的重组原核表达载体,获得高效表达hIL-17F的基因工程菌.方法利用RT-PCR法,以PHA活化的人外周血单个核细胞的总RNA为模板,

【作者】

：

谢宇锋盛伟华缪竞诚杨吉成

【机构】

：

苏州大学医学院

【出处】

：

苏州大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

白细胞介素-17F RT-PCR 基因克隆原核表达 IL-17F RT-PCR gene cloning prokaryotie expression

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目的克隆人白细胞介素-17F基因,并构建含有该目的基因的重组原核表达载体,获得高效表达hIL-17F的基因工程菌.方法利用RT-PCR法,以PHA活化的人外周血单个核细胞的总RNA为模板,扩增出hIL-17F cDNA的编码序列,并分别亚克隆至pUCm-T载体和原核表达载体pGEX-5X-3中,进行PCR、酶切鉴定和DNA序列测定.将重组原核表达载体转化感受态大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达获得包涵体融合蛋白,且Western印迹鉴定.结果 PCR产物大小及其单酶切鉴定均证明所克隆的基因是hIL-17

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