小鼠FAM3C基因重组腺病毒载体的构建及其在肾系膜细胞中的表达

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目的:利用AdEasyTMsystem构建携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒, 转染至人胚肾细胞系HEK293细胞,检测外源FAM3C在细胞中的表达.方法:取小鼠肾脏提取RNA,创建 cDNA 文库,用 PCR 的方法扩增 FAM3C 基因, 将其克隆到pEASY-1载体中,T3连接酶连接.经Bgl II单酶切后,接入pAdTraCk-CMV穿梭载体, T4连接酶连接,构建重组腺病毒的穿梭质粒pAdTraCk-CMV-FAM3C.将经PmeI线性化的pAdTrack-CMFAM3C电穿孔共转化入BJ518
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