间充质干细胞条件培养基对新生大鼠缺氧缺血脑损伤移植神经干细胞凋亡的影响

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目的研究间充质干细胞条件培养基对新生大鼠缺氧缺血脑损伤移植神经干细胞凋亡的影响。方法新生SD大鼠海马神经干细胞培养至2-3代,DAPI标记用于移植。7日龄SD大鼠左侧颈总动脉结扎并剪断后,恢复2-4小时后,放入含8%氧气、92%氮气的密闭缺氧箱中2小时缺氧,水浴锅控制箱内温度为37℃。模型随机分为四组:模型组(Ⅰ)、移植组(Ⅱ)、因子联合细胞移植组(Ⅲ)及抗体联合细胞移植组(Ⅳ)。建模后24小时,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别行右侧颈总静脉注射等体积50ul生理盐水、间充质干细胞条件培养基、含过量抗胰岛素生长因子-1抗体的间充质干细胞条件培养基;静脉注射止血后,三组均于左侧海马神经干细胞移植。Ⅰ为空白对照组。分别于移植后1、2天,称量模型大鼠体重,经心脏多聚甲醛固定后取脑、移植点附近脑组织冰冻切片并行TUNEL染色。结果四组模型大鼠体重无统计学差异;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组脑组织外源性神经干细胞凋亡率有统计学差异;四组脑组织内源性细胞凋亡率有统计学差异。结论间充质干细胞条件培养基可以改善新生大鼠缺氧缺血脑损伤移植神经干细胞的存活,降低其凋亡率;并且对内源性细胞亦有保护作用。
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