【摘 要】
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目的 建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗(groups A,C,Y,W135 meningococcal polysaccharide vaccine,MPV4)Y群多糖含量的双抗体夹心ELISA法.方法 采用杂交瘤技术制
【机 构】
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北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室
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目的 建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗(groups A,C,Y,W135 meningococcal polysaccharide vaccine,MPV4)Y群多糖含量的双抗体夹心ELISA法.方法 采用杂交瘤技术制备抗Y群多糖单克隆抗体,并通过过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体.分别以抗Y群多糖不同位点的单克隆抗体作为包被抗体和酶标二抗,通过优化反应条件来建立双抗体夹心ELISA法,同时进行方法学验证.结果 建立的双抗体夹心ELISA法特异性良好,未检出与A、C、W135群多糖的交叉反应.Y群多糖在2.5～20.0 ng/ml范围的剂量反应曲线呈现最佳线性关系,相关系数＞0.99.该法的试验内和试验间准确度较好,精密度较佳,定量限度为4 ng/ml.采用该法测定3批MPV4 Y群多糖显示,Y群多糖的含量、多糖分子大小KD值和回收率的结果均与先前的检定结果一致,符合暂行质量标准.结论 建立的双抗体夹心ELISA法可用于MPV4 Y群多糖的关键质量指标测定.
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