人β3-AR和PPAR-γ2基因真核表达载体及β3-AR稳定表达细胞株的构建

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目的构建高效表达人β3-肾上腺素受体(hβ3-AR)的真核细胞表达载体,为进一步研究hβ3-AR的功能以及与过氧化物酶体增殖体激活受体-γ2(PPAR-γ2)调控基因之间的相互影响奠定基础。方法从人肾旁脂肪组织提取总RNA,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT—PCR)方法扩增hPPAR-γ2、hβ3-ARcDNA全长序列。将EcoRI和XhoⅠ双酶切后的hβ3-ARcDNA与同样进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1(+)载体连接形成重组载体pcDNA3.1(+)/hβ3-AR。将XbaⅠ和Aft
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