【摘 要】
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为了提高目的蛋白磷脂酰丝氨酸合成酶（PSS）的表达,使用rTaq酶从E.coli K12总DNA中PCR扩增获得磷脂酰丝氨酸合成酶基因片段,将其重组于高效表达载体pET28b质粒,转入相应表达菌株
【机 构】
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沈阳药科大学生命科学与生物制药学院
【基金项目】
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辽宁省大学生创新创业训练计划项目（201210163024）
论文部分内容阅读
为了提高目的蛋白磷脂酰丝氨酸合成酶（PSS）的表达,使用rTaq酶从E.coli K12总DNA中PCR扩增获得磷脂酰丝氨酸合成酶基因片段,将其重组于高效表达载体pET28b质粒,转入相应表达菌株进行表达,收集菌体超声破碎获得含PSS的粗酶液,使用两相反应体系进行生物转化,HPLC-ELSD手段进行酶活检测.结果显示,重组菌株中PSS的酶活力比对照有所提高,同时获得酶活力提高的突变基因pssE210G.将突变基因重组于更高效的表达载体pBAD-MCS,转入相应宿主菌株表达.结果显示E.coli TOP10
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