产肠毒素大肠杆菌K88ac-STⅡ-LTA2/LTB融合基因在苜蓿中的表达

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为提高农杆菌介导的苜蓿遗传转化效率,获得转K88ac-STⅡ-LTA2/LTB基因苜蓿植株,以苜蓿下胚轴为外植体,对影响遗传转化的预培养时间、农杆菌菌液浓度、筛选方式等进行研究。结果表明,苜蓿下胚轴预培养3d,菌液浓度为OD6000.5,筛选剂Kan浓度第一阶段和第二阶段分别为30和50mg/L,延迟筛选7d时转化效率最高。对转基因苜蓿进行PCR和PT-PcR检测,初步证实目的基因已经整合到苜蓿基因组中,转化率达28.4%。
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