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目的
探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响.
方法将脂质体介导的survivin ASODN转染Hep-2细胞.噻唑蓝[3-(4,5-dimethyldiazol-2-yl)-2,5diphenyl tetrazolium bromid,MTT]法检测细胞生长抑制作用,逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测survivin mRNA和蛋白的表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,检测半胱氨蛋白水解酶3(caspase-3)活性的变化.
结果①survivin ASODN抑制Hep-2细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性;②经ASODN转染的Hep-2细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显下降;③经ASODN转染的Hep-2细胞凋亡率增加;④经ASODN转染的Hep-2细胞半胱氨蛋白水解酶3的活性增强,并呈时间依赖性.
结论survivin ASODN可能通过下调survivin mRNA和蛋白的表达而抑制Hep-2细胞增殖,诱导其凋亡.