【摘 要】
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目的:探讨丙型肝炎双移位F(DF)蛋白对肝癌细胞抑癌基因p16、p21转录与表达的影响。方法:PCR扩增HCV1b型DF基因,构建pCDNA3.0/HCV-DF真核表达载体。再转染至肝癌细胞HepG2中,G
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院,南京军区军事医学研究所,南京医科大学康达学院,江苏省疾病预防控制中心,
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目的:探讨丙型肝炎双移位F(DF)蛋白对肝癌细胞抑癌基因p16、p21转录与表达的影响。方法:PCR扩增HCV1b型DF基因,构建pCDNA3.0/HCV-DF真核表达载体。再转染至肝癌细胞HepG2中,G418筛选稳定表达细胞株,Western blot检测p16、p21蛋白表达及半定量RT-PCR法检测p16、p21基因转录,并以pCDNA3.0空质粒作为阴性对照。结果:重组质粒pCDNA3.0/HCV-DF蛋白在HepG2细胞中稳定表达,pCDNA3.0/HCV-DF转染细胞中p16、p21 mR-NA转录水平和蛋白表达水平较空质粒转染的细胞明显下降。结论:HCV-DF蛋白能够抑制p16、p21表达,提示可能参与肝细胞癌变发生发展。
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