目的探讨低氧环境对人牙周膜成纤维细胞（periodontal ligament cells,PDLCs）成骨分化的影响,以及低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）在该过程中的作用。方法组织块法原代分离牙周膜标本中PDLCs,采用激光共聚焦检测波形蛋白与细胞角蛋白表达。PDLCs分别在常氧（20%体积分数O₂）培养以及低氧（1%体积分数O₂）培养12⁷2 h,检测常氧组与低氧组PDLCs碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,比较成骨标志物ALP、I型胶原（Collogen-1,COL1）、成骨特异性转录因子（runt related transcription factor 2,RUNX2）的m RNA表达量变化,Western免疫印迹检测HIF-1α表达水平。进一步转染小干扰RNA（HIF-1α-si RNA 1,2）,检测低氧环境中PDLCs的HIF-1α水平、ALP活性与成骨标志物m RNA表达变化。采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果组织块法成功获取PDLCs,PDLCs中波形蛋白阳性表达、细胞角蛋白阴性表达。低氧环境中培养48 h后PDLCs中ALP活性下降,ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量显著降低,但HIF-1α蛋白表达升高。HIF-1α-si RNA成功敲低PDLCs中HIF-1α表达,敲低HIF-1α的PDLCs在低氧环境中的ALP活性升高,ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量增加。结论长时间低氧处理能抑制PDLCs成骨分化,敲低HIF-1α表达可逆转低氧对PDLCs成骨分化的抑制作用。