DNA修复蛋白Ku70酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活检测

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【摘要】

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目的构建Ku70蛋白酵母双杂交诱饵载体，为研究Ku70及其相互作用蛋白在乳腺癌中的作用机制奠定基础。方法采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法从人宫颈癌HeLa细胞株扩增出Ku70cDNA

【作者】

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李郝唐玉萍

【机构】

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武汉大学基础医学院,襄阳市第一人民医院检验科

【出处】

：

医学综述

【发表日期】

：

2013年22期

【关键词】

：

KU70 诱饵载体酵母双杂交自激活作用 KuT0 Bait vector Yeast two-hybrld system Self-activat

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目的构建Ku70蛋白酵母双杂交诱饵载体，为研究Ku70及其相互作用蛋白在乳腺癌中的作用机制奠定基础。方法采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法从人宫颈癌HeLa细胞株扩增出Ku70cDNA全长片段，用SalI和EcoRI双酶切Ku70cDNA片段后定向克隆到真核细胞表达载体pGBKT7，获得诱饵质粒pGBKT7-Ku70，经限制性内切酶酶切和测序鉴定后转化到酵母菌株AHl09，在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-KuT0的自激活作用，同时利用蛋白质免疫印迹检测诱饵蛋白Ku70的表达。结果Ku70cDNA

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