【摘 要】
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根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性;用软件改
【机 构】
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江苏出入境检验检疫局,南京农业大学动物医学院,河南科技大学动物科技学院
【基金项目】
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国家质检总局科研项目(2008IK145)
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根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性;用软件改造并合成peb1A基因78 bp~780 bp区间片段,PCR扩增后,构建出表达载体pET-28a(+)-peb1Ag,转化至E.coliBL21(DE3)后诱导表达,纯化后获得重组蛋白PEB1;将其进行Western blot分析、小鼠免疫试验。结果表明,克隆的peb1A基因序列与报道的NCTC 11168核苷酸同源性为
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