论文部分内容阅读
目的 依据Tet-on系统的原理,构建2个真核表达载体pTRE-Cre-EGFP(P1)和Pcmv-rtTA-EGFP-Cre-Phcmv(P2)并转染293T细胞,通过观察报告基因EGFP表达的绿色荧光,检验载体中基因元件能否正常发挥作用.方法 从pCre-IRES-EGFP载体上切下Cre-EGFP,与pTRE载体连接成P1载体,切下P1的部分片段Phcmv-Cre-EGFP 与pTet-On载体的部分片段Pcmv-rtTA连接成 P2载体,利用脂质体将pTet-on和P1共转染、将P2单转染入293