Tet-on调控的基因表达载体的构建与体外表达研究

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:camel_xz
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目的 依据Tet-on系统的原理,构建2个真核表达载体pTRE-Cre-EGFP(P1)和Pcmv-rtTA-EGFP-Cre-Phcmv(P2)并转染293T细胞,通过观察报告基因EGFP表达的绿色荧光,检验载体中基因元件能否正常发挥作用.方法 从pCre-IRES-EGFP载体上切下Cre-EGFP,与pTRE载体连接成P1载体,切下P1的部分片段Phcmv-Cre-EGFP 与pTet-On载体的部分片段Pcmv-rtTA连接成 P2载体,利用脂质体将pTet-on和P1共转染、将P2单转染入293
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