胶质细胞源神经营养因子在大鼠骨髓间充质干细胞神经分化中的表达

来源 :实用儿科临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenwu2005
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目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)神经分化及胶质细胞源神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法 体外培养大鼠BMSCs,传至第4代,行神经诱导分化.流式细胞术检测培养细胞表面的骨髓基质细胞标志CD90和造血细胞标志CD45.以10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和(或)10μg/L表皮生长因子(EGF)在含100 mL/L胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中诱导,7 d后观察其细胞形态变化,免疫组织化学法检测其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,RT-PCR检测其GDNF及其受体BET mRNA的变化.结果 BMSCs能在体外成功培养及纯化,第4代细胞高表达CD90(93.4%),不表达CD45.诱导7 d后,实验组大鼠均可见GFAP及NSE表达,而对照组为阴性.实验组中bFGF组及bFGF加EGF组表达的NSE高于EGF组,而EGF组表达GFAP更高.RT-PCR检测示BMSCs向神经细胞诱导后,GDNF表达显著增强,并促使BET基因表达,以bFGF加EGF组最明显.结论 bFGF及EGF可促进大鼠BMSCs向神经细胞分化,在向神经细胞分化的过程中,能促进GDNF和BET基因的表达,GDNF可能在BMSCs向神经细胞分化过程中起重要作用.
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