禽流感H7N9亚型病毒样颗粒疫苗的制备与免疫效果评估

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pengdou
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为了获得能代替商品化灭活苗的禽流感H7N9亚单位疫苗,试验将H7N9亚型禽流感病毒的HA基因跨膜区进行点突变,构建同时表达HA、NA和M1基因的供体质粒;然后将供体质粒转化至DH10Bac感受态细胞中,获得重组杆粒(Bacmid);将鉴定正确的重组Bacmid转染Sf9细胞,对重组杆状病毒表达的蛋白进行血凝试验、Western-blot、SDS-PAGE、透射电镜、免疫原性等一系列评价。结果表明:重组杆状病毒表达的蛋白液HA效价可达1∶2 048;Western-blot显示出现3条特异性条带;透射电镜可见与禽流感病毒结构类似的颗粒物;表达的病毒样颗粒(VLPs)蛋白制备成疫苗,HI效价略高于商品化疫苗。说明3种蛋白能自我组装成VLPs,该VLPs疫苗具有良好的免疫原性。
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