【摘 要】
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目的 探究阿奇霉素(azithromycin AZM)在体外对弓形虫(Toxoplasma gondii TOX)感染孕妇外周血单核细胞(peripheral blood mononuclezar cells PBMCs)的免疫调节作用。方法 采用密度
【机 构】
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定安县人民医院妇产科; 海南省人民医院妇产科;
【基金项目】
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海南省自然科学基金资助项目(20158312)
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目的 探究阿奇霉素(azithromycin AZM)在体外对弓形虫(Toxoplasma gondii TOX)感染孕妇外周血单核细胞(peripheral blood mononuclezar cells PBMCs)的免疫调节作用。方法 采用密度梯度(Ficoll)法分离制备PBMCs,将绿色荧光蛋白(greenfluiorescentprotein GFP)PLK弓形虫接种在PBMCs细胞上,将细胞分为PBMCs组和PBMCs+TOX组。使用60μg/ml AZM作用后,将PBMCs+TOX组分为对照组和AZM组。应用倒置荧光显微镜观察PBMCs+TOX组在60μg/ml阿奇霉素在不同作用时间点下的弓形虫增殖变化;利用免疫印迹法(western blot)及ELISA检测各处理组PBMCs细胞上免疫相关因子白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白表达水平及浓度;利用流式细胞仪检测各处理组PBMCs细胞亚群CD4+T细胞PD-1阳性率及CD4+/CD8+变化。结果 与其他作用时间点比较,阿奇霉素作用48 h抑制弓形虫增殖能力最强;与PBMCs组比较,PBMCs+TOX组PBMCs细胞IL-12、IFN-γ蛋白表达水平及浓度均下调,而TNF-α水平上调(P<0.05);AZM组PBMCs细胞IL-12、IFN-γ蛋白表达水平及浓度均高于对照组,而TNF-α低于对照组(P均<0.05);AZM组CD4+/CD8+T淋巴细胞比例上升,而CD4+T细胞PD-1阳性率表达下降。结论 阿奇霉素在体外抑制弓形虫增殖,其机制与介导弓形虫感染PBMCs孕妇细胞免疫保护有关。
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