【摘 要】
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目的:在静态及牵张力作用下,研究鸢尾素(irisin)对大鼠骨髓间充质基质细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)成骨向分化的影响。方法:分离培养原代大鼠BMSCs,应
【机 构】
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重庆医科大学附属口腔医院颌面外科口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81600832);重庆市基础科学与前沿技术研究专项资助项目(编号:cstc2016jcyjA0205);重庆市教委科学技术研究项目资助(编号:KJ1600231);重庆市社会民生科技创新专项资助项目(编号:cstc2016shmzx00010);2016年重庆高校创新团队建设计划;重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室资助项目
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目的:在静态及牵张力作用下,研究鸢尾素(irisin)对大鼠骨髓间充质基质细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)成骨向分化的影响。方法:分离培养原代大鼠BMSCs,应用四点弯曲加力系统建立体外细胞牵张模型。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测在静态及牵张力作用下,鸾尾素的浓度对BMSCs成骨向分化的影响并筛选最适鸢尾素浓度。实验分组如下:A,对照组;B,鸢尾素组(100 ng/mL鸢尾素);C,牵张力组(2000με牵张力);D,鸢尾素+牵张力组(100ng/mL鸢尾素+2000με牵张力)。细胞计数法检测各组细胞增殖情况,通过定量逆转录PCR(qRT-PCR)及Western hlot检测成骨相关mRNA及蛋白的表达,并检测P38、ERK1/2 MAPK通路表达。采用SPSS 20.0软件对数据进行统计学分析。结果:ALP活性检测结果示,在静态及牵张力作用下,鸢尾素浓度为100 ng/mL时,BMSCs的ALP活性显著升高(P<0.01)。细胞增殖检测结果示,与对照组相比,鸢尾素+牵张力组可促进BMSCs的增殖(P<0.05)。qRT-PCR结果示,鸢尾素+牵张力可促进成骨标志物Runx2、ALP、COL-Ⅰ、OPN表达的升高(P<0.05)。Western blot结果示,鸢尾素+牵张力可促进Runx2蛋白表达的升高(P<0.05)。此外,鸢尾素+牵张力联合作用促进BMSCs增殖与成骨向分化的机制可能与P38、ERK1/2 MAPK通路的激活有关。结论:鸢尾素对静态和体外牵张力作用下BMSCs增殖及成骨向分化具有促进作用,此效应可能通过P38、ERK1/2 MAPK通路发挥作用。
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