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目的 采用脂质体转染法制备miR-203过表达结肠癌HT-29细胞,探讨miR-203过表达对结肠癌HT-29细胞紫杉醇化疗敏感性的影响及可能机制.方法 取对数生长期结肠成纤维细胞CCD-18Co和结肠癌HT-29细胞,采用实时荧光定量PCR法检测miR-203相对表达量.取对数生长期结肠癌HT-29细胞,分为过表达组(转染miR-203-pcDNA 3.1质粒)、空载组(转染NC-pcDNA3.1质粒)和对照组(不作任何干预),采用实时荧光0定量PCR法检测3组转染48 h时miR-203相对表达量.取转染48 h时过表达组、空载组、对照组细胞,用1、5、10、50、100 μmol/L紫杉醇处理细胞48 h,采用MTT法测定细胞增殖抑制率,并计算3组紫杉醇对细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50).转染48 h,取对照组细胞分为对照1组和紫杉醇组,取过表达组细胞分为过表达1组和过表达+紫杉醇组,紫杉醇组和过表达+紫杉醇组应用对照组IC5.值(28.20 μmol/L)浓度的紫杉醇处理,对照1组和过表达1组不进行处理,48 h后采用流式细胞术检测4组细胞凋亡,采用Western blot法检测4组细胞磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt、caspase-3蛋白相对表达量.结果 结肠癌HT-29细胞miR-203相对表达量(0.38±0.05)低于CCD-18Co细胞(1.01±0.09)(P＜0.05).转染48 h,过表达组miR-203相对表达量(1.87±0.11)高于空载组(0.39±0.04)和对照组(0.40±0.05)(P＜0.05),空载组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).1、5、10、50、100 μmol/L紫杉醇处理48 h,过表达组细胞增殖抑制率高于空载组和对照组(P＜0.05),IC50值低于空载组和对照组(P＜0.05),空载组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).紫杉醇处理48 h,过表达1组、紫杉醇组、过表达+紫杉醇组细胞凋亡率[(18.25±1.70)％、(19.11±1.83)％、(57.59±4.31)％]高于对照1组[(8.10±1.14)％](P＜0.05),过表达+紫杉醇组高于过表达1组和紫杉醇组(P＜0.05),过表达1组与紫杉醇组比较差异无统计学意义(P＞0.05).紫杉醇处理48 h,过表达1组、紫杉醇组、过表达+紫杉醇组PI3K(0.81±0.05、0.83±0.05、0.32±0.04)、磷酸化Akt(0.57 ±0.04、0.55 ±0.04、0.18±0.03)、caspase-3(0.67±0.13,0.65± 0.10、0.19±0.10)蛋白相对表达量低于对照1组(1.12±0.09、0.80±0.06、1.25±0.12)(P＜0.05),过表达十紫杉醇组低于过表达1组和紫杉醇组(P＜0.05),过表达1组与紫杉醇组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);4组Akt蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 结肠癌HT-29细胞miR-203呈低表达,过表达miR-203可提高结肠癌HT-29细胞对紫杉醇的敏感性,促进HT-29细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K、caspase-3激活及Akt磷酸化有关.