【摘 要】
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利用亲和毛细管电泳(affinity capillary electrophoresis,ACE)法研究金属离子组和人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的竞争结合反应性能。基于位点结合模型,构建双金属
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.20877072);浙江省公益性技术应用研究计划项目(No.2012C37055)
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利用亲和毛细管电泳(affinity capillary electrophoresis,ACE)法研究金属离子组和人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的竞争结合反应性能。基于位点结合模型,构建双金属离子组[Zn2+,Cu2+]与血清白蛋白结合反应模型,建立多元金属离子组与生物大分子竞争结合的理论方程,测定结合参数并解析动力学机制。结果表明,金属离子组[Zn2+,Cu2+]与HSA发生竞争结合反应形成配合物Zn2+-HSA和Cu2+-HSA。依据有效淌度变化,通过建立的理论方程非线性拟合,竞争结合反应的平均表观结合常数KZn2+-HSA=(4.67±0.13)×104L/mol、KCu2+-HSA=(7.69±0.11)×104L/mol。结合反应均为快平衡反应,Cu2+对Zn2+的结合作用有明显拮抗作用。分析ACE谱显示,配合物的峰高与配体结合能力大小、配合物稳定性之间存在量效关系。本研究结果可为多元金属离子的蛋白质输运机理研究提供参考。
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