【摘 要】
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目的采用碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶联抗体,制备可高效分离细胞的免疫磁珠。方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再与抗体上氨基进行反
【机 构】
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上海交通大学Med-X研究院,第二军医大学国际合作肿瘤研究所
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目的采用碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶联抗体,制备可高效分离细胞的免疫磁珠。方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再与抗体上氨基进行反应,从而将抗体偶联于磁珠表面,获得免疫磁珠。使用高性能纳米粒度分析仪(HPPS)、二辛可酸(BCA)蛋白定量试剂盒、流式细胞仪、透射电镜(TEM)表征磁珠的粒径、磁珠表面联接的抗体量及其免疫活性。结果HPPS检测磁珠平均水力学粒径为110nm;磁珠表面偶联52.4μg抗CD11a+抗体/mg磁珠。经磁分离后细胞的流式分析结果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分离髓系白血病细胞系(KG-1a)细胞,免疫磁珠均匀结合于细胞表面,且不影响细胞的活性。结论成功制备可用于细胞分离且不影响分离后细胞活性的新型免疫磁珠。
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