目的:建立测定大鼠血浆中醋酸甲地孕酮浓度的HPLC法。方法:以达那唑为内标,使用正己烷进行萃取,采用HPLC法测定,色谱柱为Thermo BDS Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为甲醇-水(75∶25),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为288 nm。结果:在0.032~4μg.mL-1范围内,醋酸甲地孕酮/达那唑峰面积比(Y)与血浆中醋酸甲地孕酮的质量浓度(X)呈良好的线性关系,Y=2.70X+2.71×10-2,r=0.999 1(权重因子1/c2)。方法的定量限为0.016μg.mL-1,检测限低于0.006 4μg.mL-1,醋酸甲地孕酮高、中、低3个浓度的日内、日间精密度均小于15%,方法回收率为95%~105%,提取回收率为89%~95%。将建立的方法应用于实验室自制醋酸甲地孕酮固体分散体在大鼠体内药动学性质研究中血药浓度的测定,证实了方法的可行性。结论:本方法准确可靠,可用于大鼠血浆中醋酸甲地孕酮浓度的测定。