研究NALP3（NACHT-LRR-PYD结构域蛋白3）炎性体在牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）脂多糖刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中调控炎症因子的作用。
方法对RAW264.7细胞常规培养并平均分为3组，每组4×105个细胞：A组为对照组（细胞未处理）；B组为1 mg/L Pg脂多糖刺激组；C组为胱天蛋白酶1抑制剂（AC-YVAD-CMK）预处理+1 mg/L Pg脂多糖刺激组。C组RAW264.7细胞采用连续稀释（5、10、25、50、75、100、200 μmol/L）的AC-YVAD-CMK预处理2 h，随后Pg脂多糖（1 mg/L）孵育24 h，通过细胞计数试剂盒检测细胞生存率。采用实时荧光定量PCR检测3组RAW264.7细胞6 h后NALP3和白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）基因转录水平；蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定法检测3组细胞24 h后上述两种蛋白的表达。
结果不同浓度（0、5、10、25、50、75、100、200 μmol/L）AC-YVAD-CMK处理RAW264.7细胞对细胞活力无明显影响；实时荧光定量PCR结果显示，A、B、C组IL-1β mRNA表达分别为1.03±0.08、5.48±0.22和4.31±0.20；NALP3 mRNA分别为0.96±0.05、2.62±0.44、1.73±0.09；蛋白质印迹法结果显示，A、B、C组NALP3蛋白的表达量分别为1.00±0.10、2.34±0.04、1.64±0.04；酶联免疫吸附测定结果显示，A、B、C组IL-1β的分泌值分别为（40.20±0.25）、（61.50±1.81）、（52.40±1.91）ng/L。在Pg脂多糖刺激下，IL-1β基因和蛋白表达显著增加（P<0.01，P<0.01），同时NALP3基因和蛋白表达显著升高（P<0.01，P<0.01）；运用AC-YVAD-CMK预处理后IL-1β基因表达和蛋白质合成显著减少（P=0.002，P=0.027），NALP3基因表达和蛋白质合成显著降低（P<0.01，P<0.01）。
结论Pg脂多糖可激活RAW264.7细胞中NALP3炎性体信号通路，阻断该通路可以抑制炎症因子分泌。