探讨极光激酶B选择性抑制剂AZD1152 (AZD) 对顺铂耐药卵巢上皮性癌 (卵巢癌) 细胞的作用。
方法以顺铂耐药卵巢癌细胞株Hey细胞为研究对象,实验分为4组,AZD组、顺铂组、AZD+顺铂组、对照组,四甲基偶氮唑蓝 (MTT) 比色法检测4组Hey细胞的相对增殖率[以吸光度 (A) 药物组/A对照组×100%表示],生物荧光法检测4组Hey细胞的凋亡水平[以半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (caspase) 3/7相对活性表示],荧光原位杂交 (FISH) 技术检测4组Hey细胞中h TERC和C-myc癌基因的表达[h TERC (红色) 、C-myc (绿色) 的荧光点数分别表示h TERC和C-myc基因的拷贝数]及Hey细胞的染色体倍数[SE7 (蓝色) 的荧光点数表示染色体的倍体数]。
结果MTT比色法检测显示,AZD组 (10和20 nmol/L的AZD分别处理24和48 h) Hey细胞的相对增殖率[10、20 nmol/L的AZD处理24 h时分别为 (81.4±3.6) %、 (81.4±3.6) %,处理48 h时分别为 (43.1±2.0) %、 (38.5±1.6) %],均明显低于对照组的100% (P<0.01) ;且同一浓度的AZD处理时,随着处理时间 (分别为24、48 h) 的延长,其增殖抑制作用明显增强 (P<0.01) 。与顺铂组 (2、4、7μmol/L的顺铂分别处理24和48 h) 相比,AZD+顺铂组 (10或20 nmol/L的AZD+ 2、4或7μmol/L的顺铂分别处理24和48 h) Hey细胞相对增殖率明显下降 (P<0.01),而且AZD和顺铂两药间存在叠加效应。生物荧光法检测显示,AZD组 (10 nmol/L) Hey细胞中caspase-3/7的相对活性为1.45±0.08,与对照组 (1.00) 比较,差异有统计学意义 (P=0.000) ;AZD+顺铂组 (10 nmol/L的AZD+ 4μmol/L的顺铂) 、顺铂组 (4μmol/ L) Hey细胞中caspase-3/7的相对活性分别为1.76±0.12、1.01±0.04,AZD+顺铂组分别与顺铂组、AZD组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) 。FISH技术检测显示,与对照组、顺铂组相比,AZD组和AZD+顺铂组细胞中h TERC、C-myc的拷贝数和Hey细胞的染色体倍数均明显增加,差异均有统计学意义 (P<0.05) 。
结论AZD可以有效抑制顺铂耐药卵巢癌Hey细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。AZD单用或与顺铂联合使用均可诱导Hey细胞多倍体的形成。