实时荧光定量PCR和RT-PCR检测宫颈癌细胞株HPV-16 E6和E7基因的实验研究

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目的探讨实时荧光定量PCR和RT-PCR检测HPV-16E6和E7基因的实验方法。方法将制备的含HPV-16E6和E7基因的质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株进行HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数的定量检测。结果建立的实时荧光定量PCR标准曲线相关系数大于0.99,PCR效率在90%以上。HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数在宫颈癌细胞株CaSki、SiHa和HeLa中从高到低依次是CaSki>SiHa>HeLa。结论用实时荧光定量PCR和RT-PCR方法研究HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA含量结果可靠,为进一步研究两个基因与宫颈病变的关系奠定了基础。
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