介导入硫氧还蛋白基因转移的重组腺病毒构建

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangxinyu999
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目的 应用基因重组方法构建携带人硫氧还蛋白(hTRX)基因的复制缺陷型重组腺病毒。方法 用内切酶、RT-PCR、测序方法获得目的基因片段,然后将其cDNA克隆至表达载体pShuttle构建hTRX的重组真核细胞表达载体pShuttle—hTRX,在HeLa细胞中进行瞬时表达检测。从真核表达载体pShuttle—hTRX切下目的基因,并插入至腺病毒载体构建hTRX的重组腺病毒载体Adeno—hTRX,经PCR方法亦证明了成功构建腺病毒重组体。重组腺病毒在293细胞中扩增、纯化。结果 成功构建了携带人硫氧还蛋白基因的复制缺陷型重组腺病毒,并以多种方法证实了构建载体的正确性。结论 正确构建的人硫氧还蛋白重组腺病毒载体,可为基因治疗心血管系统疾病打下良好基础。

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